1、第一：百度搜索pubmed，点击pubmed主页，进入pubmed主页，下拉到最底下，选择FEATURED那栏的Primer-Blast，点击进入新页面。新页面除了修改图二Use my own forward primer (5'->3' on plus strand)；Use my own reverse primer (5'->3' on minus strand)和图三Organism两个部位，其他部位不需要改动。
2、第二：Use my own forward primer (5'->3' on plus strand)在这一栏的空白处输入你获得引物的前导链，（比如我在文献中获得引物MD-2，rattus，ATCTGCAACTCCTCCGATGC），在Use my own reverse primer (5'->3' on minus strand)在这一栏相对应的输入后随链（比如：GCACAAATCCATTGGTTCCCT）。然后将Organism那个部位的人源性改成大鼠源性即改为Rattus（根据你获得的引物的种属来看，如果你的种属是人源性就不需要改）
3、第三：完成步骤二后点击页面左下方的get primers，进入新页面。得到引物验证的结果。出现该引物的特性，转录特异性，长度和引物温度之类的所有相关指标。例子中的结果表明该条引物特异性并不是很好，有两条转录变异本。建议换一条。
