1、将所需试剂从微孔板中取出，放置室温（20～25℃）30min以上，液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出所需数量的微孔板，将不用的微孔板与干燥剂一起重新真空密封，保存于2～8℃。不要冷冻。
3、洗涤工作液在使用前也需回温。
4、将样本和标准品对应微孔编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本50ml到对应的微孔中，加入酶标物50ml/孔，轻轻怖俄嘬湓振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min。
6、小心揭开盖板膜，用洗涤工作液充分洗涤300ml/孔，洗板5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干。
7、加入显色液100ml/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温避光环境反应30min。
8、加终止液50ml/孔，轻轻振荡混匀，设酶标仪于450nm处读每孔OD值。
